miR-193b-3p过表达的HCT116外泌体对HUVEC增殖凋亡、迁移、血管形成影响及其与PAK4靶向关系
孙玮螺
刘素英
李思锦
周龙妹
何培元
承德医学院附属医院消化内科,河北承德 067000
摘要：目的 观察微小核糖核酸193b-3p(miR-193b-3p)过表达的人结直肠癌(CRC)细胞(HCT116)外泌体对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖凋亡、迁移、血管形成影响,并分析miR-193b-3p与p21活化蛋白激酶4(PAK4)的靶向关系.方法 收集CRC患者血清和HCT116细胞上清外泌体,透射电镜实验和纳米颗粒示踪分析观察和鉴定外泌体,RT-qPCR实验检测外泌体miR-193b-3p和PAK4 mRNA.取人脐静脉内皮细胞(HUVEC),并分组,PBS组加入100 µL的PBS,HCT116-Exo组加入100 µL的HCT116细胞外泌体,HCT116-Exo+GW4869组先用GW4869(10 µmol/L)处理30 min,然后加入100 µL的HCT116细胞外泌体,采用EdU实验、Transwell实验和成管实验检测各组HUVEC细胞增殖、迁移和血管形成能力.取对数生长期的HUVEC细胞,并分为miR-NC组、miR-193b-3p组,miR-NC组与转染miRNA阴性对照(miR-NC)的HCT116细胞外泌体共培养,miR-193b-3p组与转染miR-193b-3p模拟物(miR-193b-3p mimics)的HCT116细胞外泌体共培养,采用CCK8实验、流式细胞术实验和成管实验检测各组HUVEC细胞活性、细胞周期、细胞凋亡和血管形成能力.双荧光素酶报告基因系统检测miR-193b-3p和PAK4的靶向关系.结果 CRC患者血清和细胞外泌体miR-193b-3p表达升高,PAK4 mRNA表达降低(P均<0.05);CRC细胞外泌体可促进HUVEC细胞的增殖、迁移和血管形成(P均<0.05);过表达CRC细胞外泌体miR-193b-3p增加HUVEC细胞活力和血管形成、加速细胞周期进程、抑制细胞凋亡(P均<0.05);miR-193b-3p直接靶向PAK4抑制其荧光素酶活性(P<0.05).结论 CRC血清、癌细胞外泌体miR-193b-3p表达升高,加入HCT116细胞外泌体的HUVEC细胞增殖、迁移和血管形成能力增强,加入转染miR-193b-3p mimics HCT116细胞外泌体的HUVEC细胞增殖、S期占比、血管形成能力升高及G0/G1期占比、凋亡率下降,miR-193b-3p与PAK4存在靶向关系.
关键词：结直肠癌外泌体微小核糖核酸193b-3pP21活化蛋白激酶4细胞增殖细胞迁移细胞凋亡细胞周期血管生成
分类号：R735.35(消化系肿瘤)
资助基金：河北省医学科学研究课题计划项目(20231365)
论文发表日期：2024-08-25
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 13-18 )
英文信息