糖宁孜亚比土斯片基于高糖人结直肠腺癌细胞模型对小克里斯滕森菌-TαMCA-FXR/TGR5轴的调控作用
黄冰1
王玲1
关亚群2
钟江3
热比亚·努力2
1.新疆医科大学基础医学院,乌鲁木齐 8300172.新疆医科大学基础医学院,乌鲁木齐 830017;新疆地方病分子生物学重点实验室3.复旦大学生命科学学院
摘要：目的 探讨糖宁孜亚比土斯片(TZT)基于高糖人结直肠腺癌细胞模型对小克里斯滕森菌科-牛磺-α鼠胆酸钠盐(TαMCA)-法尼醇X受体(FXR)/G蛋白偶联受体5轴的调控作用.方法 配制菌株液体培养基、高糖培养基、TZT溶液、TαMCA溶液,培养菌株,制备灭活小克里斯滕森菌及其发酵液,常规培养人结直肠腺癌细胞(Caco-2细胞).取部分细胞随机分为对照组、灭活菌体组、106 CFU/mL活菌组、107 CFU/mL活菌组、108 CFU/mL活菌组、109 CFU/mL活菌组,对照组用无菌Caco-2专用培养基培养,灭活菌体组用灭活小克里斯滕森菌菌体悬液干预,106 CFU/mL活菌组、107 CFU/mL活菌组、108 CFU/mL活菌组、109 CFU/mL活菌组分别在含有完全分化的Caco-2细胞培养板孔中加入2 mL 109 CFU、108 CFU、107 CFU、106 CFU的小克里斯滕森菌活菌干预.取部分细胞随机分为对照组、发酵培养液组,对照组用无菌Caco-2专用培养基培养,发酵培养液组用小克里斯滕森菌发酵液干预.取部分细胞随机分为对照组、高糖组及TZT低、中、中高、高剂量组,除对照组外其他各组加入8 g/L高糖培养基干预24 h,TZT低、中、中高、高剂量组分别加入10、25、50、100 μg/mL的TZT含药培养基干预24 h.取部分细胞随机分为对照组、25 μmol/L TαMCA组、50 μmol/L TαMCA组,后两组换入25、50 μmol/L的含TαMCA培养基干预24 h.实时荧光定量PCR法检测FXR、TGR5、IL-8、IL-10 mRNA,Western blotting法检测FXR、TGR5蛋白.结果 与对照组比较,106 CFU/mL活菌组、107 CFU/mL活菌组、108 CFU/mL活菌组、109 CFU/mL活菌组TGR5 mRNA表达高(P均<0.05),FXR、IL-8、IL-10 mRNA表达差异无统计学意义(P均>0.05).与对照组比较,菌发酵液组FXR mRNA表达高(P均<0.05),TGR5 mRNA表达差异无统计学意义(P均>0.05).与对照组比较,高糖组FXR mRNA表达高(P<0.05),TGR5 mRNA表达低(P<0.05),FXR、TGR5蛋白表达差异无统计学意义(P均>0.05).与高糖组比较,各TZT组FXR mRNA表达低(P均<0.05),TGR5 mRNA表达高(P均<0.05),FXR、TGR5蛋白表达差异无统计学意义(P均>0.05).与对照组比较,25 μmol/L TαMCA组FXR mRNA、蛋白表达低(P均<0.05),TGR5 mRNA、蛋白表达高(P均<0.05);50 μmol/L TαMCA组FXR蛋白表达低(P<0.05).结论 小克里斯滕森菌具有一定的抗炎效果,TZT可能通过促进小克里斯滕森菌的生长,产生代谢产物影响胆汁酸代谢,促进TαMCA肠道内累积,进一步抑制肠FXR表达,促进TGR5表达.
关键词：糖宁孜亚比土斯片法尼醇X受体G蛋白偶联受体5胆汁酸肠道菌群小克里斯滕森菌人结直肠腺癌细胞高糖
分类号：R587.1(内分泌腺疾病及代谢病)
资助基金：国家自然科学基金(81860743)天山创新团队项目(2022D14009)
论文发表日期：2024-11-05
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 40-45 )
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