柚皮素对脂多糖诱导的软骨细胞焦亡抑制作用及其机制
艾孜热提·阿布都卡地尔1
周静1
买吾拉尼江·依孜布拉2
1.新疆医科大学第一附属医院药学部,乌鲁木齐 8300542.新疆医科大学中心实验室
摘要：目的 观察柚皮素(NAR)对脂多糖(LPS)诱导的软骨细胞焦亡的抑制作用,并探讨其可能的机制.方法 将对数生长期的C28/I2细胞分为LPS组(用含100 ng/mL LPS的DMEM培养基培养)、LPS+NAR组(用含100 ng/mL LPS+100 μmol/L NAR的培养基培养)、LPS+NAR+DORS组(用含100 ng/mL LPS+100 μmol/L NAR+50 μmol/L腺苷—磷酸激活蛋白激酶α(AMPKα)抑制剂DORS的培养基培养)、Control组(普通培养基培养),均培养8 h.取各组细胞,采用CCK-8法检测细胞增殖光密度(OD)值,TUNEL法检测细胞凋亡率,Western blotting法检测焦亡标志物[白细胞介素18(IL-18)、消皮素D(GSDMD)]、AMPKα、磷酸化AMPKα(p-AMPKα)、NLRP3炎症小体标志蛋白[凋亡相关的半胱氨酸蛋白酶激活和召募结构域蛋白(ASC)、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶1(Caspase-1)、核苷酸结合寡聚化域样受体家族带脒基结构域3(NLRP3)、切割模式的Caspase-1(cleaved-Caspase-1)]蛋白相对表达量,ELISA法检测细胞上清液IL-1β、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平.结果 Control组、LPS+NAR组、LPS+NAR+DORS组、LPS组细胞增殖OD值依次降低、细胞凋亡率依次升高,细胞IL-18、GSDMD、ASC、Caspase-1、NLRP3、cleaved-Caspase-1蛋白相对表达量依次升高,p-AMPKα蛋白相对表达量依次降低,细胞上清液IL-1β、IL-6、TNF-α水平依次升高而IL-10、IL-13水平依次降低,组间两两比较P均<0.05.LPS组、LPS+NAR+DORS组细胞AMPKα蛋白相对表达量均低于Control组、LPS+NAR组(P均<0.05).结论 NAR可抑制LPS诱导的软骨细胞焦亡,其机制可能与激活AMPKα信号通路、抑制NLRP3炎症小体介导的炎症反应有关.
关键词：柚皮素AMPKα信号通路NLRP3炎症小体软骨细胞细胞焦亡
分类号：R684.3(骨科学（运动系疾病、矫形外科学）)
资助基金：新疆维吾尔自治区自然科学基金资助项目(2023D01C318)
论文发表日期：2024-12-15
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 26-30 )
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