新型CD47阻断型单克隆抗体的筛选及其抗结直肠癌活性观察
卢杨1
袁向飞2
张砚君1
范冬梅1
熊冬生1
1.中国医学科学院血液病医院(中国医学科学院血液学研究所)血液与健康全国重点实验室 国家血液系统疾病临床医学研究中心 天津市血液病细胞治疗研究重点实验室 细胞生态海河实验室,天津 300020;天津医学健康研究院,天津 3016002.天津市急腹症器官损伤与中西医修复重点实验室 天津市南开医院,天津 300100
摘要：目的 筛选靶向人CD47蛋白的新型阻断型单克隆抗体并观察其抗结直肠癌活性,为靶向人CD47靶点的免疫治疗提供新选择.方法 利用单克隆抗体筛选技术获得能够稳定分泌CD47抗体的鼠源杂交瘤细胞株,制备小鼠腹水,纯化获得抗体纯品47-F.采用流式细胞术检测47-F抗体与CD47蛋白的亲和力,观察47-F抗体与商品CD47抗体B6H12.2对靶细胞结合的竞争性;采用红细胞凝集实验检测47-F抗体的红细胞毒性.分离人外周血单核细胞来源的巨噬细胞,采用细胞吞噬实验观察47-F抗体、B6H12.2抗体及同型对照抗体对人巨噬细胞吞噬结肠癌细胞HCT116和SW620能力的体外促进作用.建立小鼠皮下结肠癌移植瘤模型,采用分层随机分组法将小鼠分为抗体给药组和PBS对照组,观察47-F抗体对小鼠结肠癌移植瘤生长的体内抑制作用.结果 47-F抗体能够有效结合CD47蛋白,具有较高亲和力;47-F抗体能有效竞争商品抗体B6H12.2对人CD47蛋白的结合,且具有浓度梯度依赖性.红细胞凝集实验结果显示,47-F抗体未引起红细胞凝集,红细胞毒性较低.与对照抗体比较,47-F抗体、B6H12.2抗体均提高了人巨噬细胞对SW620、hCT116细胞的吞噬率,且47-F抗体的促吞噬作用高于B6H12.2抗体(P均<0.05).47-F抗体给药第19天,抗体给药组肿瘤体积小于PBS对照组(P<0.05),肿瘤抑制率为80.6%.结论 成功筛选获得了一株新型CD47阻断型单克隆抗体47-F;该抗体具有亲和力强、促吞噬活性强、低红细胞毒性的特点,抗结直肠癌活性较强.
关键词：CD47单克隆抗体结直肠癌肿瘤相关巨噬细胞红细胞毒性
分类号：R979.1(药品)
资助基金：国家自然科学基金(82400238)中国医学科学院医学与健康科技创新工程项目(2021-I2M-1-041)
论文发表日期：2025-04-25
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 37-41 )
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