NEK2基因敲低对多发性骨髓瘤细胞介导骨质破坏及NF-κB信号通路的影响
王鹏1
郭洁1
路来同1
仲江波1
潘盼2
王洪超3
刘静4
1.山东第一医科大学附属济南市中心医院骨科,山东 济南 2500132.山东第一医科大学附属济南市中心医院病理科,山东 济南 2500133.山东省公共卫生临床中心骨二科,山东 济南 2500004.首都医科大学附属北京天坛医院血液内科,北京 100070
摘要：目的 探讨中心体相关激酶2(NEK2)基因敲低对多发性骨髓瘤(MM)细胞介导骨质破坏及核因子κB(NF-κB)信号通路的影响.方法 取MM细胞系(MM.1S细胞、RPMI 8226细胞),均设置NEK2敲低组、阴性对照组,分别用慢病毒载体-NEK2-RNA干扰、病毒CON077进行感染,用实时荧光定量反转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测NRK2 mRNA表达以确认转染效率,选择敲低效率低的细胞与MM细胞共培养.提取骨髓基质细胞(BMSC),将其分为阴性对照组、NEK2敲低组,分别加入RPMI 8226细胞、敲低NEK2的RPMI 8226细胞共培养,RT-qPCR法检测细胞内骨质破坏相关指标NF-κB受体活化因子配体(RANKL)、骨保护蛋白(OPG)mRNA表达.取NEK2敲低组、阴性对照组MM细胞,用CCK-8法检测细胞增殖(以吸光度值表示),流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blotting法检测NF-κB信号通路相关蛋白NF-κB、乙酰肝素酶(HPSE)表达,RT-qPCR法检测NF-κB、HPSE mRNA表达.结果 MM.1S细胞、RPMI-8226细胞NEK2敲低组NEK2 mRNA相对表达量均低于其阴性对照组(P均<0.05),基因敲低效率分别为92.2%、64.0%.与BMSC的阴性对照组比较,NEK2敲低组RANKL mRNA表达低(P<0.05),而OPG mRNA表达高,但差异无统计学意义(P>0.05).与MM.1S细胞、RPMI-8226细胞的阴性对照组比较,其NEK2敲低组吸光度值低,细胞凋亡率高,NF-κB、HPSE mRNA相对表达量低(P均<0.05),NF-κB、HPSE蛋白表达低.结论 NEK2基因敲低可能通过调控NF-κB信号通路抑制MM细胞增殖、促进其凋亡,降低HPSE表达,从而抑制MM细胞介导的骨质破坏.
关键词：多发性骨髓瘤骨髓瘤骨病骨质破坏中心体相关激酶2核因子κB信号通路多发性骨髓瘤细胞骨髓基质细胞
分类号：R733.3(造血器及淋巴系肿瘤)
资助基金：山东省自然科学基金青年项目(ZR2020QH121)山东省医药卫生科技发展计划项目(2018WS481)
论文发表日期：2025-05-25
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 7-11 )
英文信息