巨噬细胞-肌成纤维细胞转化在急性肺损伤后早期肺纤维化中的作用机制
胡胜娟1
胡蝶2
吴磊3
1.武汉科技大学医学院公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学教研室,湖北 武汉 430065;职业危害识别与控制湖北省重点实验室,湖北 武汉 430065;鄂州市中心医院儿科,湖北 鄂州 4360002.武汉科技大学医学院公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学教研室,湖北 武汉 430065;职业危害识别与控制湖北省重点实验室,湖北 武汉 430065;武汉大学人民医院呼吸与危重症医学科,湖北 武汉 4300603.武汉科技大学医学院公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学教研室,湖北 武汉 430065;职业危害识别与控制湖北省重点实验室,湖北 武汉 430065
摘要：目的 探讨巨噬细胞-肌成纤维细胞转化(MMT)在急性肺损伤后早期肺纤维化中的作用机制.方法 取18只SPF健康小鼠,分为模型组和空白组,模型组小鼠采用脂多糖构建肺损伤早期纤维化小鼠模型,空白组小鼠在相同干预时点气管、腹腔注射同体积生理盐水.造模完成后第3、7、10天取小鼠肺组织标本,采用Ashcroft评分评价小鼠肺组织纤维化程度,采用免疫荧光染色法测算肺组织MMT表型的肌成纤维细胞数量[CD68和α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)共标记],分别采用Western blotting法及ELISA法检测小鼠肺组织母亲DPP同源物3(Smad3)、转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白.取5只小鼠,麻醉后脱颈处死,收集双侧股骨、胫骨骨髓腔内容物,加入含10 ng/mL巨噬细胞集落刺激因子的H-DMEM培养液,分离培养骨髓来源巨噬细胞(BMDMs).取BMDMs细胞分为干预组和对照组,干预组在培养液中加入终浓度10 ng/mL的TGF-β1刺激诱导,第5天采用流式细胞仪检测CD68和α-SMA均阳性的即为MMT表型肌成纤维细胞,对照组不作任何处理.分别于培养24、48、96 h时取两组细胞,采用Western blotting法检测成纤维细胞α-SMA、Smad3蛋白,采用RT-PCR法检测纤维化指标α-SMA、纤维连接蛋白(Fibronectin)、胶原蛋白1(Collagen-1)mRNA.结果 与对照组相比,第7、10天模型组小鼠Ashcroft评分增加(P均<0.05);与对照组相比,造模第7、10天模型组肺组织中Smad3、TGF-β1蛋白相对表达量高(P均<0.05).体外实验中,随时间延长,干预组Smad3、α-SMA蛋白和α-SMA、Fibronetin、Collagen-1 mRNA相对表达量均增加(P均<0.05).结论 随损伤时间延长,急性肺损伤小鼠肺组织MMT表型细胞比例逐渐增加.MMT表型细胞可能通过调控TGF-β1/Smad3信号通路,促进肺损伤小鼠肺纤维化的发生发展.
关键词：巨噬细胞成纤维细胞巨噬细胞-肌成纤维细胞转化肺损伤肺纤维化
分类号：R563(呼吸系及胸部疾病)
论文发表日期：2025-09-25
在线出版日期：2025-10-22（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 35-39 )
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