环状RNA 0006750靶向调控微小RNA-876-3p对脓毒性相关急性肾损伤的影响
王会芳1
马媛媛2
张鑫3
陈凯雯3
张晓丽4
赵建荣3
王晓寅3
1.河北北方学院附属第二医院肾内科,河北 张家口 0751002.河北北方学院附属第二医院检验科,河北 张家口 0751003.河北北方学院附属第二医院急诊科,河北 张家口 0751004.河北北方学院生命科学研究中心,河北 张家口 075000
摘要：目的 观察环状RNA 0006750(circ_0006750)是否通过靶向调控微小RNA-876-3p(miR-876-3p)影响脓毒性相关急性肾损伤(SAKI)的发展.方法 取人肾皮质近曲小管上皮细胞(HK2),分别加入0、2.5、5、10 μg/mL的LPS培养24 h,构建SAKI模型,采用实时荧光定量PCR法测算各浓度干预细胞circ_0006750、miR-876-3p,采用Spearman相关性分析circ_0006750与miR-876-3p相关性.另取10 μg/mL LPS诱导的SAKI模型细胞分为6组,分别转染sh-NC载体(干扰对照组)、sh-circ_0006750载体(circ_0006750干扰组)、sh-circ_0006750载体+miR-876-3p抑制物(circ_0006750和miR-876-3p联合干扰组)、NC-OE载体(过表达对照组)、circ_0006750-OE载体(circ_0006750过表达组)、circ_0006750-OE载体+miR-876-3p模拟物(circ_0006750和miR-876-3p联合过表达组),于培养24、48和72 h时采用CCK-8法观察各组细胞增殖情况,采用流式细胞仪观察各组细胞凋亡情况,检测各组细胞检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、活性氧(ROS)及丙二醛(MDA).分别采用荧光素酶报告基因试验和RNA pull-down试验,验证HK2细胞circ_0006750与miR-876-3p的靶向关系.结果 随着LPS浓度增加,HK2细胞circ_0006750相对表达量下调、miR-876-3p相对表达量增加(P均<0.05);SAKI模型中circ_0006750与miR-876-3p的表达呈负相关(r=-0.795,P=0.015).与干扰对照组相比,circ_0006750干扰组培养24、48、72 h OD值降低,细胞凋亡率增加,细胞TNF-α、IL-1β、IL-6、ROS及MDA的含量升高(P均<0.05);与circ_0006750干扰组相比,circ_0006750和miR-876-3p联合干扰组培养24、48、72 h OD值升高,细胞凋亡率下降,细胞TNF-α、IL-1β、IL-6、ROS及MDA的含量降低(P均<0.05);与过表达对照组相比,circ_0006750过表达组培养24、48、72 h OD值升高,细胞凋亡率下降,细胞TNF-α、IL-1β、IL-6、ROS及MDA的含量降低(P均<0.05);与circ_0006750 过表达组相比,circ_0006750 和miR-876-3p联合过表达组培养24、48、72 h OD值下降,细胞凋亡率增加,细胞TNF-α、IL-1β、IL-6、ROS及MDA的含量升高(P均<0.05).circ_0006750通过海绵吸附作用直接结合并抑制miR-876-3p表达.结论 circ_0006750可能通过靶向miR-876-3p促进HK-2细胞增殖,抑制细胞凋亡、炎症反应和氧化应激,从而延缓SAKI的进展.
关键词：环状RNA 0006750微小RNA-876-3p脓毒性相关急性肾损伤炎症反应氧化应激
分类号：R631(外科感染)
资助基金：河北省医学科学研究课题(20250142)
论文发表日期：2025-09-25
在线出版日期：2025-10-22（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 40-45 )
英文信息