重组人干扰素α2b在体外对肠道病毒71型的抗病毒作用及其机制
蒲俏虹
陈至里
杨彤
周莹
张少俊
刘劼
林淑健
彭拓华
广东省生物制品与药物研究所耐药监测室,广东 广州 510440
摘要：目的 观察重组人干扰素α2b(rhuIFN-α2b)在体外对肠道病毒71型(EV71)的抗病毒作用,并探讨其机制.方法 将人横纹肌肉瘤(RD)细胞以1.0×104/孔接种96孔板,待其长满后分为阻断作用组、直接杀病毒组、抑制作用组,并同步设置病毒对照组(仅病毒感染)、细胞对照组(未处理).阻断作用组同时加入100 TCID50的EV71病毒液与不同浓度(2.5×104、1.25×104、6.25×103、3.125×103、1.563×103、781.25、390.625 IU/mL)的rhuIFN-α2b;直接杀病毒组先将100 TCID50的EV71与不同浓度rhuIFN-α2b混合后再感染细胞;抑制作用组先用100 TCID50的EV71感染细胞,再加入不同浓度的rhuIFN-α2b;各组细胞继续培养48 h后,通过显微镜观察病毒病变效应(CPE),采用MTT法测算细胞存活率,并通过剂量-反应曲线计算药物的半数有效浓度(EC50)和半数细胞毒性浓度(CC50),最终计算选择指数SI.取RD细胞,同时加入100 TCID50 的EV71病毒液和2.5×104、1.25×104、6.25×103 IU/mL的rhuIFN-α2b,培养48 h后,采用实时荧光定量PCR法检测EV71病毒VP1 mRNA.取RD细胞,同时加入100 TCID50的EV71病毒液和2.5×104 IU/mL的rhuIFN-α2b,培养48 h后,采用实时荧光定量PCR法检测IL-6、TNF-α mRNA.结果 在加入2.5×104 IU/mL的rhuIFN-α2b后,阻断作用组、直接杀病毒组、抑制作用组均出现CPE.rhuIFN-α2b浓度为781.25～2.5×104 IU/mL的阻断作用组细胞存活率均高于病毒对照组(P均<0.05),rhuIFN-α2b浓度为1.563×103～2.5×104 IU/mL直接杀病毒组和抑制作用组细胞存活率均高于病毒对照组(P均<0.05).阻断作用组、直接杀病毒组、抑制作用组的选择指数SI分别为25.43、16.73、20.90.加入浓度为2.5×104、1.25×104、6.25×103 IU/mL的rhuIFN-α2b后,EV71病毒VP1 mRNA的相对表达量均降低(P均<0.05).加入2.5×104 IU/mL的rhuIFN-α2b后细胞IL-6、TNF-α mRNA相对表达量均降低(P均<0.05).结论 rhuIFN-α2b在体外对EV71具有阻断、抑制和直接杀病毒作用,其机制可能与抑制EV71病毒VP1基因表达和抑制炎症因子IL-6和TNF-α表达有关.
关键词：重组人干扰素α2b手足口病肠道病毒71型抗病毒作用
分类号：R978.7(药品)
资助基金：广东省医学科学技术研究基金项目(A2022151)广东省医学科学技术研究基金项目(A2022520)广东省医学科学技术研究基金项目(B2024102)广东省中医药局科研项目(20222025)
论文发表日期：2025-10-25
在线出版日期：2025-11-20（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 28-33 )
英文信息