t-PA cDNA基因在AGZY83-a细胞系的稳定表达
赵永波1
张莹2
李钰3
王枫2
张贵寅3
关振中2
1.200080,上海市第一人民医院神经科,复旦大学市一临床医学院2.尔滨医科大学附属第二医院3.尔滨医科大学基础医学院医学遗传学研究室
摘要：目的建立稳定表达人组织型纤溶酶原激活剂(tissue-type plasminogen activator,t-PA)的细胞系.方法将t-PA的反义DNA(t-PA cDNA)连接在真核表达载体pcDNA3.1(+)的Kpn I和Xb Ⅰ酶切位点上,构建成重组质粒pcDNA3.1(+)t PA.用FuGENE6介导法转入人类AGZY83-a细胞系中,经G418筛选形成阳性克隆,接种于培养基中培养,检测表达产物.结果各种酶切图谱及筛选后单克隆形成,证明tPA cDNA已正确组装在载体上,培养液中rt-PA的含量高于对照组且可持续12周,表明pcDNA3.1(+)tPA已可在AGZY83-a细胞中得到表达.结论转染tPA cDNA的AGZY83-a细胞已可稳定表达人类tPA,为血栓性疾病的基因治疗奠定了一定的基础.
关键词：t-PA cDNA基因AGZY83-a细胞表达
分类号：R338(人体生理学)
论文发表日期：2001-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 14-18 )
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