重组大鼠质粒pEGFP-GDNF的构建及大鼠胚胎神经干细胞转染的研究
赵永波
王晓梅
刘文文
1.200080,上海交通大学附属第一人民医院神经科2.200080,上海交通大学附属第一人民医院神经科3.200080,上海交通大学附属第一人民医院神经科
摘要:目的探讨携带GDNF基因的神经干细胞表达载体的构建方法.方法采用RT-PCR方法从大鼠胎脑组织总RNA中扩增出该基因的全序列cDNA,并克隆到增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的真核表达载体pEGFP-C1中,经酶切鉴定及测序分析对重组质粒pEGFP-GDNF作进一步鉴定.采用阳离子脂质体将重组质粒pEGFP-GDNF转染至鼠胚胎神经干细胞.结果大鼠GD-NF cDNA已正确地克隆到真核表达载体pEGFP-C1中,而构建成重组大鼠质粒pEGFP-GDNF.GDNF基因在细胞中可稳定表达.结论神经干细胞可直接作为基因靶细胞,能被GDNF真核细胞表达载体pEGFP-GDNF有效的感染.
关键词:质粒转染GDNF神经干细胞
分类号:R741(神经病学)
资助基金:上海市重点项目(024119037)上海市引进海外高层次留学人员专项基金(20040105)
论文发表日期:2005-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:3( 250-252 )
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