Sirt1对SH-SY5Y细胞突触囊泡蛋白表达的影响
何静1
王蓉2
1.100053 北京,首都医科大学宣武医院中心实验室2.100053 北京,首都医科大学宣武医院中心实验室;100053 北京脑重大疾病研究院阿尔茨海默病研究所;100053 北京老年医学研究中心
摘要：目的 探讨Sirt1对突触囊泡蛋白表达的影响和其在突触前位点的功能.方法 采用CRISPRa技术激活SH-SY5Y细胞内源Sirt1表达,通过转染aSirt1质粒将细胞分为aSirt1#1、aSirt1#2、aSirt1#3、aSirt1#NC组并设置空白对照(Mock)组.采用乳酸脱氢酶检测细胞毒性,通过Western blot检测突触囊泡蛋白及自噬相关蛋白表达水平.结果 aSirt1#1组和aSirt1#3组细胞毒性低于aSirt1#NC组,差异有统计学意义(P＜0.05).aSirt1#1组细胞的Sirt1、突触素、囊泡相关膜蛋白2(VAMP2)、α-突触核蛋白(α-Syn)表达水平高于Mock组,差异有统计学意义(P＜0.05).aSirt1#1组SH-SY5Y细胞中自噬相关蛋白Atg13、Becln1表达水平高于Mock组,自噬底物SQSTM1表达水平低于Mock组,差异均有统计学意义(均P＜0.05).aSirt1#1组SH-SY5Y细胞中P-AMPK/AMPK、P-ULK1/ULK1比值高于Mock组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 Sirt1可以通过激活AMPK-ULK1通路的来调节自噬,影响突触囊泡蛋白的表达,有利于突触囊泡循环,影响突触前位点的功能.
关键词：自噬CRISPR转录激活Sirt1突触素
论文发表日期：2024-04-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 243-249 )
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