抗玉米赤霉烯酮单克隆抗体的制备及ELISA检测试剂盒的研制
王雄1
荣钊2
蒙海超3
吴继宗4
陈冰君2
王彦斐2
果旗2
1.北京中检维康技术有限公司;中国原子能科学研究院2.北京中检维康技术有限公司3.长江大学生命科学学院4.中国原子能科学研究院
摘要：制备并鉴定抗玉米赤霉烯酮(ZEN)单克隆抗体杂交瘤细胞株,研制检测谷物中ZEN的ELISA检测试剂盒.将ZEN肟化成ZEN-6-CMO,ZEN-6-CMO在DCC与NHS作用下与牛血清白蛋白(BSA)或卵清白蛋白(OVA)偶联合成完全抗原.以ZEN-6-CMO-BSA为抗原,免疫BALB/c小鼠,用ELISA筛选并建立分泌抗ZEN抗体的杂交瘤细胞株.测定单抗免疫球蛋白亚类、单抗效价及特异性.在ZEN单克隆抗体(Z9C3)的基础上,用间接竞争ELISA研究试剂盒的各项指标.试验结果表明:建立了2株稳定分泌抗ZEN抗体的杂交瘤细胞株(Z9C3和Z7E6),该细胞株所分泌的单隆抗体Ig亚类均为IgG1,ELISA检测结果表明:抗ZEN抗体可与ZEN发生特异性反应,IC50为3 ng/mL和1.3 ng/mL,该抗体与玉米赤霉醇(ZEL)的交叉反应分别为1.5.9%和9.8%.试剂盒最低检出质量浓度为0.5 ng/mL,标准曲线的线性范围为0.5～50 ng/mL;对玉米和小麦的平均添加回收率分别是92.5%和91.7%,变异系数分别是8.5%和10.5%.
关键词：玉米赤霉烯酮杂交瘤细胞单克隆抗体ELISA
论文发表日期：2010-11-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 39-42 )