耐酸性高温α-淀粉酶的诱变筛选及表达菌株的构建
温赛
孟青青
王玉海
王风寰
1.北京工商大学食品学院,北京,1000482.北京工商大学食品学院,北京,1000483.北京工商大学食品学院,北京,1000484.北京工商大学食品学院,北京,100048
摘要：利用化学诱变剂亚硝酸钠对地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)中高温α-淀粉酶基因amy进行体外诱变,通过定向筛选获得一个耐酸性高温α-淀粉酶突变体,其一级序列含有3个突变位点:第288位的亮氨酸突变为天冬氨酸,第289位的组氨酸突变为酪氨酸,第320位的丙氨酸突变为丝氨酸.克隆突变体基因amyM并构建地衣芽孢杆菌表达质粒pGJ103-amyM,将其转入已敲除内源α-淀粉酶基因的地衣芽孢杆菌中获得表达耐酸性高温α-淀粉酶的基因工程菌B.licheniformis AMYM.B.licheniformis AMYM所产新型耐酸性高温α-淀粉酶的最适反应pH为5.2,较野生型降低1.2个单位,且最适反应温度95℃.5L发酵罐内,B.licheniformis AMYM发酵酶活最高可达19 000 U/mL,具有良好的工业应用前景.
关键词：地衣芽孢杆菌化学诱变耐酸性α-淀粉酶
分类号：S816(普通畜牧学)
资助基金：国家自然科学基金(21406005)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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