一株纤维降解菌β-葡萄糖苷酶基因的克隆与表达及酶学性质分析
王后福1
廖奇1
李鹏飞1
陶杨2
鲁琼芬2
杨仁辉1
冷静3
1.云南农业大学云南省动物营养与饲料重点实验室,云南昆明6502012.云南农业大学动物科学技术学院,云南昆明6502013.云南农业大学云南省动物营养与饲料重点实验室,云南昆明650201;云南农业大学动物科学技术学院,云南昆明650201
摘要：试验对1株娄彻氏链霉菌(B5)的β-葡萄糖苷酶(高活性纤维降解酶)基因进行克隆,通过构建高效表达的载体实现基因表达,对所得表达产物的酶学性质进行测定分析,为饲用纤维素酶的开发利用提供参考.通过PCR扩增B5的Egl基因的完整CDS序列,构建pET-32a-egl表达载体,转化到BL21(DE3)大肠杆菌感受态细胞.试验成功构建了高产β-葡萄糖苷酶的基因工程大肠杆菌,实现了β-葡萄糖苷酶的分泌表达,其分子量约4.1×104 U,酶学特性分析表明,在40℃、pH值8、底物浓度为3.0× 10-2 mol/L时,酶活力最高,为1 085 U/mL.
关键词：娄彻氏链霉菌β-葡萄糖苷酶基因克隆酶学性质纤维降解
分类号：S816(普通畜牧学)
资助基金：国家自然科学基金(31672452)国家自然科学基金(31060314)云南省现代农业(肉羊)产业技术体系项目(2017KJTX0016-5)云南省科技计划(2018BB001-2)
论文发表日期：2020-02-28
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 50-55 )
英文信息