耐热β-甘露聚糖酶的异源表达及低聚寡糖制备研究
者园园1
苗华彪1
吴倩2
慕跃林2
黄遵锡2
1.云南师范大学生命科学学院,云南昆明6505002.云南师范大学生命科学学院,云南昆明650500;云南能源持续开发利用教育部工程中心,云南昆明650500;云南省生物质能与环境生物技术重点实验室,云南昆明650500
摘要：研究从魔芋基地筛选产甘露聚糖酶菌株,并克隆甘露聚糖酶基因.设计兼并引物获得目的基因,通过电转化法至毕赤酵母GS115中实现异源表达,研究该重组酶的酶学特性.结果显示,重组甘露聚糖酶DL4man基因为1104 bp,蛋白分子量为41.5 kDa,糖苷水解酶26家族.最适反应pH值为5.5,最适反应温度为55℃,70℃下半衰期为70 min,80℃下耐受100 min后剩余46％的酶活,属于耐高温甘露聚糖酶,具有良好的胃-胰蛋白酶耐受性.酶解角豆胶的产物主要是聚合度为2、3、4、5的甘露寡糖.酶解魔芋粉的主要产物是聚合度为2、3的甘露寡糖.研究实现耐高温甘露聚糖酶在毕赤酵母GS115中的异源表达.研究表明,该酶酶解魔芋粉、角豆胶均能够生成甘露低聚糖,可为甘露低糖的制备提供参考.
关键词：β-甘露聚糖酶枯草芽孢杆菌克隆表达酶学性质甘露寡糖
分类号：S816(普通畜牧学)
资助基金：中央引导地方科技发展科技成果转移转化项目(202107AC110002)国家自然科学基金(31960131)云南师范大学研究生科研创新基金项目(YJSJJ21-B65)
论文发表日期：2021-12-30
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 63-68 )
英文信息