蛋白酶枯草芽孢杆菌工程菌株WB800N/pHT43-npr-PrsA的发酵工艺优化
曹倩荣
刘春卯
郑翔
贾振华
吴芳彤
河北省微生物研究所有限公司,河北保定 071051
摘要：试验旨在优化枯草芽孢杆菌工程菌株WB800N/pHT43-npr-PrsA的发酵蛋白酶活性,为国内饲用蛋白酶企业提供技术支持.试验对发酵过程进行葡萄糖含量和比消耗速率监测,确定碳源、氮源对该菌株葡萄糖消耗的动态影响.通过单因素和响应面试验对发酵培养基成分进行优化.结果显示:以0～10 h菌体OD600nm值为参数优化发酵培养基,以促进菌体生长,获得更高菌体量.10 h以后以酵母粉5g/L、蛋白胨70g/L进行补料,延长稳定期,以达到最大单位酶活性.优化发酵培养基的培养条件为:酵母粉60g/L、蛋白胨30g/L、消旋葡萄糖10g/L、MgSO43 g/L,发酵8h时,添加0.5‰异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)和2‰蛋白酶抑制剂,最终发酵蛋白酶活性为1 156 U/mL.研究表明,延迟稳定期能够提高培养基中蛋白胨含量,有利于提高菌体对葡萄糖比消耗速率,蛋白胨对菌体适应周围环境有促进作用,发酵过程中维持葡萄糖浓度处于较低的水平,可以有效避免乙酸生成,促进菌体生长和提高产酶效能,使菌体对底物的消耗保持最旺盛状态.
关键词：蛋白酶工程菌株酶活性发酵工艺
分类号：S816.7(普通畜牧学)
资助基金：河北省科学院科技计划项目(23315)
论文发表日期：2024-07-31
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 100-106 )
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