干扰F4BP4基因对绵羊子宫内膜上皮细胞脂质积累及迁移的影响
陈岩
刘畅
魏盼盼
喻恒彬
张童
胡广东
石河子大学动物科技学院,新疆石河子 832003
摘要：研究旨在探究脂肪酸结合蛋白4(FABP4)基因对绵羊子宫内膜上皮细胞脂质积累及迁移的影响.设计3条FABP4干扰片段,将片段与pGBplv-U6-mcherry-puro连接构建干扰载体,以空载质粒为对照(NC组),3条干扰重组质粒分别为FABP4-shRNA1、FABP4-shRNA2、FABP4-shRNA3,对重组质粒进行酶切鉴定.质粒转染后RT-qPCR鉴定干扰效率,Western Blot对载体干扰效果进行进一步验证.将载体转染至体外培养的子宫内膜上皮细胞中,BODIPY法检测脂滴聚集情况,使用试剂盒检测细胞中甘油三酯含量,RT-qPCR检测脂代谢及增殖迁移相关基因,细胞划痕试验检测细胞迁移情况.结果显示:所有载体均可有效干扰FABP4基因的表达,其中FABP4-shRNA2载体干扰效果最好.在干扰子宫内膜上皮细胞FABP4基因表达后,与NC组相比,细胞中脂滴聚集能力下降,甘油三酯含量降低,细胞脂质代谢和增殖迁移相关基因mRNA表达下降,划痕愈合速度降低;降低子宫内膜上皮细胞FABP4基因表达后,细胞脂质积累水平及细胞迁移能力下降.研究表明,FABP4基因可能对绵羊妊娠和胚胎正常发育具有重要作用,值得在育种实践中进行更深入研究.
关键词：绵羊子宫内膜上皮细胞FABP4RNAi
分类号：S826(家畜)
资助基金：兵团重点领域科技攻关计划项目(2021AB014)石河子大学高层次人才科研启动资金专项项目(RCZK201941)
论文发表日期：2024-08-15
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 51-56 )
英文信息