蛋鸡GABRA1基因shRNA干扰载体构建及其对等级前卵泡颗粒细胞分子调控作用
陈晓霞1
杨辉2
邹贤群1
余静1
刘永杰1
1.吉林农业科技学院动物科技学院,吉林吉林 1321012.吉林省万邦鹅业技术服务有限公司,吉林白城 131300
摘要：试验旨在探究γ-氨基丁酸A型受体亚基α1(GABRA1)基因对蛋鸡等级前卵泡颗粒细胞分子的调控作用.采用靶向特异性短发夹RNA(shRNA)干扰技术,构建干扰表达载体.试验分为3组,分别是空白组(BC组)、阴性对照组(NC组)和shRNA GABRA1干扰组(shRNA GABRA1组),分别转染到蛋鸡等级前卵泡颗粒细胞(4～8mm),转染48 h后,利用实时荧光定量RT-qPCR、Western Blot技术,探讨其对鸡卵泡颗粒细胞增殖基因细胞周期蛋白D1(CCND1)、细胞分化、类固醇合成基因类固醇合成快速调节蛋白(StAR)和细胞色素P450家族11亚家族A成员1(CYP11A1)、细胞凋亡基因半胱天冬酶-3(Caspase-3)和B-细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)的mRNA和蛋白表达水平的影响,采用EDU试剂盒和流式细胞术检测颗粒细胞增殖和凋亡状况.结果显示,与BC组和NC组相比,shRNA GABRA1组的CCND1、StAR、CYP11A1和Bcl-2基因的mRNA和蛋白质表达极显著升高(P＜0.01),Caspase-3基因的mRNA和蛋白质表达极显著降低(P＜0.01);颗粒细胞的增殖指数显著升高(P＜0.05),总凋亡率显著下降(P＜0.05).研究表明,GABRA1能够抑制鸡早期卵泡颗粒细胞的增殖和分化,促进凋亡,进而影响卵泡的生长和发育.
关键词：shRNA干扰GABRA1颗粒细胞增殖凋亡
分类号：S831(家禽)
资助基金：吉林省科技发展计划项目(YDZJ202201ZYTS609)
论文发表日期：2025-03-28
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 71-77 )
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