塞内卡病毒3C蛋白酶活性中心Q33/Y145位点功能鉴定及对病毒复制的影响
靳新顺
冉旭华
闻晓波
海南大学热带农林学院,海南海口 570228
摘要：试验旨在探究3C蛋白特定氨基酸位点突变对塞内卡病毒A(SVA)复制能力的影响.以野生毒株CHN/SVA/HB/2018(WT)为研究材料,结合3C蛋白结构信息,采用生物信息学分析方法筛选出关键位点,预测突变前后氢键网络和蛋白结构变化,并通过无污染的IBRS-2细胞拯救出突变病毒,测定病毒滴度和生长曲线,使用荧光定量PCR(RT-qPCR)检测突变毒株转录水平.结果显示,33位氨基酸(Q33)折叠自由能最高,而145位氨基酸(Y145)空间位置最远.Q33和Y145突变为赖氨酸后,等电点升高、不稳定指数下降并且氢键网络减少,3C结合槽的微结构域也发生改变.突变毒株生长趋势与WT相似,但病毒滴度和转录能力极显著低于WT(P＜0.01).研究表明,WT的3C蛋白中Q33和Y145可能是影响病毒复制的关键位点.利用反向遗传操作对3C蛋白进行替换突变,可降低蛋白结构稳定性,影响3C活性,降低病毒增殖能力和复制能力,使其具备成为SVA弱毒活疫苗候选毒株的潜力.
关键词：生物信息学分析塞内卡病毒(SVA)3C蛋白生长特性
分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)
资助基金：海南省自然科学基金资助项目(320RC461)海南省现代农业产业技术体系建设专项项目(HNARS2022-02-G04)
论文发表日期：2025-07-16
在线出版日期：2025-09-09（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 111-116 )
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