真核表达质粒pcDNA3.1(+)-DNFGFR1在小鼠BMSCs中的表达及意义
李霞1
徐永清1
李福兵1
庞荣清2
杨杜明1
刘华1
1.成都军区昆明总医院骨科,全军创伤骨科研究所,云南昆明 6500322.成都军区昆明总医院干细胞与组织器官工程研究中心,云南昆明,650032
摘要：目的 探讨含有基因成纤维细胞生长因子受体1显性负性分子(DN FGFRl)的真核表达质粒pcDNA3.1(+)-DNFGFR1转染骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)后的表达及意义.方法 体外分离培养C57/BL小鼠BMSCs,应用综合贴壁的方法纯化BMSCs.由阳离子脂质体介导将pcDNA3.1(+)DNFGFR1转入BMSCs中,用RT PCR法检测DNFGFRl mRNA的表达.结果 小鼠BMSCs原代培养24h后见细胞贴壁伴有伸展现象,细胞核清晰,10d左右细胞密度明显增加,细胞形成单层,融合率达80％,综合贴壁培养使BM-SCs更纯.转染组条带灰度值与β-actin比值(3.8)明显高于未转染组(0.5).结论 pcDNA3.1(+)DNFGFR1质粒能被导入BMSCs并得到表达,为研究FGFR1的功能奠定了实验基础.
关键词：骨髓间充质干细胞显性负性作用成纤维细胞生长因子受体1基因表达小鼠
分类号：R683(骨科学（运动系疾病、矫形外科学）)R34(基础医学)
资助基金：国家自然科学基金(81171734)中国博士后科学基金面上项目(20100481529)
论文发表日期：2012-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 1091-1094 )
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