纯化前后C57BL/6小鼠骨髓细胞诱导破骨细胞的方法研究
杜天舒
朱澍
闫昭
张大伟
曹晓瑞
1.空军军医大学西京骨科医院关节外科,陕西西安 7100322.空军军医大学西京骨科医院关节外科,陕西西安 7100323.空军军医大学西京骨科医院关节外科,陕西西安 7100324.空军军医大学西京骨科医院关节外科,陕西西安 7100325.空军军医大学西京骨科医院关节外科,陕西西安 710032
摘要：目的 研究纯化前后C57BL/6小鼠骨髓细胞向破骨细胞体外诱导条件,总结利用原代细胞诱导破骨细胞技巧.方法 将纯化前后的原代细胞按不同密度接种(ρ=5×105 cells/cm2及ρ=2.5×105 cells/cm2),并在不同时机加入诱导因子,观察各组中抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)染色阳性细胞数以及破骨细胞标志性基因的表达水平.结果 未纯化原代骨髓细胞用低密度接种(2.5×105 cells/cm2)时,无法诱导出破骨细胞;加大接种密度(5×105 cells/cm2)后,利用巨噬细胞集落刺激因子(macrophage co[ony-stimulating factor,MCSF)与NF-κB受体激活蛋白配体(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)共刺激可诱导出破骨细胞.纯化后原代细胞用低密度(2.5×105 cells/cm2)接种,利用M-CSF预处理或与RANKL共刺激这两种诱导方法均能诱导出破骨细胞,且预处理法诱导效果更佳.结论 利用原代骨髓细胞诱导破骨细胞,当其中单核细胞比例较低时,应优先考虑加大细胞接种密度,并尽早加入RANKL,促进单核细胞向破骨细胞分化.
关键词：原代骨髓细胞破骨细胞体外培养
分类号：R329.2(人体形态学)
资助基金：国家自然科学基金(81501936)
论文发表日期：2020-09-25
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 802-806 )
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