circPDE4B调控miR-7对骨关节炎中软骨ECM降解和细胞凋亡的影响
范金柱1
任小宇1
从飞1
宋涛1
郭云山2
马强3
1.西安交通大学附属红会医院骨显微修复外科,陕西西安 7100542.西安交通大学附属红会医院脊柱外科,陕西 西安 7100543.西安交通大学附属红会医院足踝外科,陕西 西安 710054
摘要：目的 探讨circPDE4B调控miR-7对骨关节炎(osteoarthritis,OA)中软骨细胞外基质(extracellular matrix,ECM)降解和凋亡的影响及机制.方法 采用实时荧光定量聚合酶链式反应(real time-quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测circPDE4B和miR-7在OA软骨组织和软骨细胞中的表达水平.在OA软骨细胞中分别转染 oe-NC 和 oe-circPDE4B,或者转染 si-NC、si-circPDE4B 和共转染 si-circPDE4B+miR-7 inhibitors后,RT-qPCR和免疫蛋白印迹(western blot,WB)检测ECM相关分子SOX9、CO)L2A1、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)3和MMP13的表达水平;流式细胞术检测细胞凋亡情况.采用双荧光素酶报告基因检测circPDE4B和miR-7的结合情况.结果 circPDE4B的表达水平在OA软骨组织和软骨细胞中明显低于正常软骨组织和软骨细胞(P＜0.05).过表达circPDE4B能够明显抑制OA软骨细胞的凋亡和凋亡相关分子Cleaved-caspase-3蛋白的表达水平(P＜0.05).同时,过表达circPDE4B能够明显促进SOX9和COL2A1的表达水平(P＜0.05),抑制MMP3和MMP13的表达水平(P＜0.05).荧光素酶报告基因检测结果显示circPDE4B能够靶向结合miR-7(P＜0.05),过表达circPDE4B能够抑制miR-7的表达(P＜0.05).circPDE4B和miR-7在OA患者软骨组织中的表达水平呈负相关(P＜0.05).共转染si-circPDE4B和miR-7 inhibitors能够反转单独转染si-circPDE4B对OA软骨细胞凋亡和软骨ECM降解的促进作用(P＞0.05).结论 circPDE4B在OA软骨组织和软骨细胞中明显低表达,circPDE4B能够通过靶向结合miR-7抑制OA软骨细胞凋亡和软骨ECM降解.
关键词：骨关节炎circPDE4BmiR-7细胞外基质凋亡
分类号：R684.3(骨科学（运动系疾病、矫形外科学）)
资助基金：陕西省自然科学基础研究计划项目(2020JM-687)西安交通大学基本科研业务费项目(xzy01201923)
论文发表日期：2022-06-25
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 512-517 )
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