Gαi1/3 蛋白介导 Akt-GSK3β-NFATc1信号通路调控破骨细胞分化机制研究
史册1
高运2
杨光辉1
1.徐州医科大学附属宿迁医院,南京鼓楼医院集团宿迁医院骨科,江苏宿迁 2238002.扬州大学附属医院骨科,江苏扬州 225100
摘要：目的 观察G蛋白抑制性α亚单位1/3(Gαi1/3蛋白)对骨髓源性巨噬细胞(bone marrow-derived macrophages,BMMs)向破骨细胞分化的调控作用及其作用机制.方法 采用慢病毒敲减及基因敲除策略,获取scr-shRNA、Gαi1/3-shRNA 及 Gαi1/3 双敲除(Gαi1/3-double knock out,Gαi1/3-DKO)三种 BMMs,加入巨噬细胞集落刺激因子(macrophage colony stimulating factor,MCSF)、核因子 κB 受体活化因子配体(receptor activator for nuclear factor-κB ligand,RANKL),MCSF+RANKL处理 30 min,采用 Western Blot 对 Akt-GSK3β-NFATc1 信号通路中蛋白表达进行检测.MCSF和RANKL联合诱导scr-shRNA、Gαi1/3-shRNA BMMs 4 d染色后观察破骨细胞细胞核数目、破骨细胞大小及数量.予小鼠骨质疏松模型右侧股骨干骺端微量注射慢病毒scr-shRNA及Gαi1/3-shRNA,观察敲减Gαi1/3对于小鼠骨质丢失的逆转作用.结果 敲减、敲除Gαi1/3对MCSF及MCSF+RANKL诱导Akt-GSK3β-NFATc1通路中关键蛋白(p-Akt473、p-GSK3β、NFATc1)的活化产生抑制作用.同时,敲减Gαi1/3抑制破骨细胞的分化以及抑制骨质疏松模型中小鼠骨质丢失.结论 Gαi1/3蛋白通过介导Akt-GSK3β-NFATc1通路调控破骨细胞分化,可为临床治疗骨质疏松提供新的思路和治疗靶点.
关键词：Gαi1/3蛋白巨噬细胞集落刺激因子骨髓源性巨噬细胞骨质疏松症
分类号：R329.2(人体形态学)
资助基金：宿迁市科学技术局自然科学基金面上项目(K202016)宿迁市中医药科技项目(YB202211)徐州医科大学附属医院发展基金(XYFM2021043)徐州医科大学江苏省高校重点实验室开放课题(XZSYSKF2022014)
论文发表日期：2023-12-25
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 1095-1099 )
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