探讨实时荧光定量PCR法检测血液新生隐球菌的临床意义

黄铭珊; 金霆

doi:10.3969/j.issn.1674-7151.2015.01.008

摘要：目的：探讨实时荧光定量PCR（real－time fluorescent quantitative polymerase chain reaction， RT－FQ－PCR）法检测新生隐球菌感染的临床应用价值。方法选择2014年2月－2014年7月就诊的47例疑似新生隐球菌感染患者的血液标本，采用常规培养基培养方法以及RT－FQ－PCR法进行检测，计算检测新生隐球菌的阳性率，并进行统计学分析。采用RT－FQ－PCR法对新生隐球菌、光滑念珠菌、克柔念珠菌、烟曲霉、黑曲霉、大肠杆菌、肺炎球菌、金黄色葡萄球菌和链球菌这些常见真菌和细菌的DNA进行检测，评价RT－FQ－PCR法的特异性。采用RT－FQ－PCR和常规培养基培养法对稀释至5个／mL的新生隐球菌菌液进行检测，评价RT－FQ－PCR法的灵敏度。结果采用RT－FQ－PCR法，以新生隐球菌特异性引物为探针对新生隐球菌和其他常见真菌及细菌进行检测，只有新生隐球菌出现荧光信号。 RT－FQ－PCR在5个／mL浓度的新生隐球菌菌液中检测出新生隐球菌，而常规培养基培养法未检测出。在47例疑似新生隐球菌感染患者中，常规培养基培养方法检测出11例，阳性率为23.40％，而RT－FQ－PCR法检测出14例，阳性率为29.79％，二者经比较差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 RT－FQ－PCR法与常规培养基培养法对新生隐球菌的检测具有很好的一致性。且RT－FQ－PCR法能够检测出较低浓度的新生隐球菌，较常规培养基培养法快速、灵敏度高、特异性强，可缩短报告时间，为临床早期诊断及治疗新生隐球菌感染提供可靠依据。