我国HCV主要基因型优势抗原表位的筛选
万祥辉1
杨细媚2
邹学森1
1.江西省肿瘤医院检验科, 南昌市,3300292.江西省儿童医院检验科, 南昌市,330030
摘要:目的 针对我国丙型肝炎病毒(hepatitis C virus, HCV)主要基因型筛选出能有效诱导体液免疫和细胞免疫的抗原多肽. 方法 利用生物信息学方法预测评估我国HCV主要基因型1b、2a、6a型的优势B、CTL和Th抗原表位. 以HCV-CTL、HCV-B+HCV-Th、HCV-CTL+HCV-B+HCV-Th组合肽作为免疫原免疫BALB/C小鼠, 经乳酸脱氢酶释放法检测CTL杀伤活性、ELISPOT法检测分泌IFN-γ能力、ELISA法检测抗体滴度,对检测结果进行统计学分析. 结果 SP2/0对照细胞未产生特异性免疫应答,而SP2/0-NS3实验细胞HCV-CTL+HCV-B+HCV-Th和HCV-CTL均诱导了特异性的CTL应答,且当效靶比为25:1和50:1时, 三组间差异均有统计学意义 (F=2045,F=6338,P均<0.05), 且HCV-CTL+HCV-B+HCV-Th联合免疫激活的CTL 活性高于HCV-CTL 单独免疫,HCV-CTL 单独免疫高于PBS空白对照,差异均有统计学意义(P均<0.05). 细胞体液联合免疫、单独体液免疫、单独细胞免疫刺激的分泌IFN-γ的细胞数量差异有统计学意义(F=5308,P<0.05). 单独体液免疫、单独细胞免疫刺激的分泌IFN-γ的细胞数量均低于细胞、体液联合免疫,单独体液免疫刺激的分泌IFN-γ的细胞数量高于单独细胞免疫,且差异均有统计学意义(P均<0.05). 不同时间点不同免疫原所诱导的特异性的IgG抗体滴度差异均有统计学意义 (P均<0.01). 不同时间点用HCV-CTL+HCV-B+HCV-Th联合免疫和HCV-B+HCV-Th免疫所诱导的特异性IgG抗体滴度均显著高于PBS空白对照, 且差异均有统计学意义(P均<0.05),而细胞体液联合免疫与单独体液免疫之间特异性IgG抗体滴度经比较,差异无统计学意义(P>0.05). 结论 HCV-CTL+HCV-B+HCV-Th联合免疫诱导了高效的体液免疫和细胞免疫应答,有望进一步开发为有效的重组HCV疫苗.
关键词:丙型肝炎病毒多价疫苗基因型联合免疫
资助基金:江西省科技厅项目(20122BAB215033)
论文发表日期:2015-10-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:5( 236-240 )
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实用检验医师杂志

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ISSN:1674-7151
年,卷(期):2015,7(4)
所属栏目:检验与临床