叶酸代谢能力评估及亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性检测试剂盒性能验证
许晔琼
赵一琳
高曼秋
215500 江苏常熟,常熟市医学检验所
摘要：目的 对江西诺德医疗器械有限公司生产的叶酸代谢能力测定试剂盒进行性能验证,评估该试剂盒能否满足江苏省常熟地区患者对亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因A1298C(rs1801131)及C677T(rs1801133)两个多态性位点的检测需求.方法 收集 10 例临床样本进行测序,将结果作为"金标准",同时采用实时荧光聚合酶链反应(PCR)对标本的MTHFR基因多态性位点进行检测,与"金标准"结果比较,验证试剂盒的准确性.选择测序确定的C677T多态性位点CC及TT基因型标本各 1 份,A1298C多态性位点AA及CC基因型标本各 1 例,重复测定 5 次以验证试剂盒的精密度.同时对以上 4 份不同基因型的标本进行DNA浓度测定,根据试剂盒说明书中的性能描述,稀释至最低检出浓度 5 mg/L,每例标本各检测 3 次,要求基因分型结果一致且符合测序分型结果,验证试剂盒的检测下限.结果 所有标本的MTHFR基因多态性位点检测结果与测序结果完全一致,准确率达到 100%;对不同基因型的 4 例标本反复检测 5 次的结果完全一致,且循环阈值(Ct值)的变异系数(CV)≤5%;而稀释到检测下限的 4 例标本经过3 次重复检测后,仍能准确进行基因分型.结论 采用MTHFR基因A1298C及C677T两个多态性位点检测试剂盒进行基因分型的结果准确、稳定、可靠,能满足实验室对MTHFR基因多态性检测的要求.
关键词：亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性性能验证
论文发表日期：2024-03-15
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 73-77 )
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