自噬抑制2-DG诱导内皮细胞凋亡
米萱
杨力
仇利红
宋雅娟
石定
陈琳
苏映军
1.第四军医大学西京医院全军整形外科研究所, 陕西 西安,7100322.第四军医大学西京医院全军整形外科研究所, 陕西 西安,7100323.第四军医大学西京医院全军整形外科研究所, 陕西 西安,7100324.第四军医大学西京医院全军整形外科研究所, 陕西 西安,7100325.第四军医大学西京医院全军整形外科研究所, 陕西 西安,7100326.第四军医大学西京医院全军整形外科研究所, 陕西 西安,7100327.第四军医大学西京医院全军整形外科研究所, 陕西 西安,710032
摘要:目的 探讨2-脱氧-D-葡萄糖(2-DG)诱导人脐静脉血管内皮细胞发生凋亡与自噬及两者之间的关系.方法 传代培养人脐静脉血管内皮细胞,在常氧实验条件下,细胞被分为对照组,不同浓度的2-DG组、2-DG联合甘露糖组、阳性对照组(衣霉素组),利用MTS比色法检测2-DG对人脐静脉血管内皮细胞增殖活性的影响;利用Western blot免疫印记技术,检测细胞内质网应激相关蛋白-葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的表达水平,以反映处理后的细胞内质网应激的水平变化;以Annexin V-PI流式细胞术检测人脐静脉血管内皮细胞凋亡.为了检测2-DG对细胞自噬的影响,引入自噬抑制剂3-MA,采用Western blot免疫印记技术,检测自噬相关蛋白Beclin 1和Atg5的表达水平,以反映处理后的细胞自噬水平变化.结果 2-DG组细胞增殖活力明显降低,与对照组相比具有统计学意义,且该抑制作用呈剂量依赖性;2-DG联合甘露糖组增殖活力有所增加,与单独2-DG组相比具有统计学意义;2-DG组凋亡率明显增加,与对照组相比具有统计学意义,2-DG联合甘露糖组细胞凋亡减少,与单独2-DG组相比具有统计学意义;2-DG组GRP78蛋白水平增加,与对照组相比具有统计学意义;加入甘露糖后,GRP78蛋白水平减少,与单独2-DG组相比具有统计学意义;2-DG组Bec-lin1和Atg5蛋白表达均有所增加,与对照组相比具有统计学意义;3-MA预处理细胞抑制自噬后,2-DG诱导的细胞凋亡增多,Beclin1和Atg5蛋白表达也有所减少,与2-DG组相比具有统计学意义.结论 2-DG显著抑制人脐静脉血管内皮细胞增殖,诱导人脐静脉血管内皮细胞凋亡及自噬;内质网应激可能是介导2-DG诱导细胞凋亡的相关作用机制;2-DG诱导的细胞自噬则能抑制细胞凋亡.
关键词:2-DG人脐静脉内皮细胞凋亡自噬内质网应激
分类号:R329.2(人体形态学)
资助基金:陕西省社会发展攻关计划项目(2014K11-03-09-11)
论文发表日期:2016-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 242-245 )
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