经LED黄光照射的人间充质干细胞旁分泌效应对成纤维细胞光老化的作用研究
曹佼佼1
王金涛1
蔡宏2
1.100080 北京,中国人民解放军医学院皮肤科2.中国人民解放军空军特色医学中心皮肤科
摘要：目的 研究经LED黄光照射的人脂肪间充质干细胞(hADSCs)旁分泌效应对人真皮成纤维细胞(HDFs)光老化的影响.方法 利用中波紫外线(UVB)照射HDFs构建光老化模型,并进行细胞增殖、细胞衰老、细胞迁移实验.使用不同能量梯度(2.5、5.0、7.5、10.0 J/cm2)LED黄光照射hADSCs进行细胞增殖实验,确定最佳照射能量(10J/cm2).实验组用LED黄光10 J/cm2照射的hADSCs上清液培养光老化HDFs,对照组用未经照射的hADSCs上清液培养光老化HDFs,用CCK-8法检测2组细胞增殖能力,用β-半乳糖苷酶染色检测2组细胞衰老水平,用微丝绿色荧光探针标记细胞骨架,用流式细胞仪检测细胞活性氧(ROS)含量,并进行转录组测序,对测序发现的显著差异基因进行实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)验证、京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析.结果 与未照射组比较,UVB照射组HDFs增殖能力下降,衰老细胞(蓝染细胞)明显增多,HDFs迁移受到抑制,差异均有统计学意义(P＜0.05).与对照组比较,经LED黄光照射的hADSCs上清液干预的实验组光老化HDFs增殖能力较强、蓝染细胞较少、细胞形态较为细长、ROS含量较低,差异均有统计学意义(P＜0.05).转录组测序发现6个有意义的差异表达基因:驱动蛋白家族成员20B(KIF20B)、异常纺锤体样小头畸形相关蛋白(ASPM)、A型激酶锚定蛋白9(AKAP9)、着丝粒蛋白F(CENPF)、着丝粒蛋白E(CENPE)、RB1的诱导卷曲蛋白1(RB1CC1).qRT-PCR 结果显示,实验组 KIF20B、ASPM、AKAP9、CENPF、CENPE、RB1CC1 mRNA 表达高于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05),与转录组测序结果一致.KEGG通路富集分析显示,显著差异基因富集在长寿调节通路(longevity regulating pathway).结论 经LED黄光照射的hADSCs旁分泌效应对HDFs的光老化具有抑制作用,可能与激活长寿调节通路有关.
关键词：光老化成纤维细胞紫外线人脂肪间充质干细胞
分类号：R751(皮肤病学)
资助基金：空军后勤部开放项目(BKJ21J016)
论文发表日期：2024-10-10
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 262-268,286 )
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