人胰激肽释放酶基因的克隆及表达载体的构建
杜珙
李体远
黄瑞芳
陈德珩
戴勇
1.518020,暨南大学医学院第二附属医院深圳市人民医院2.518020,暨南大学医学院第二附属医院深圳市人民医院3.518020,暨南大学医学院第二附属医院深圳市人民医院4.518020,暨南大学医学院第二附属医院深圳市人民医院5.518020,暨南大学医学院第二附属医院深圳市人民医院
摘要：目的:克隆中国人胰组织激肽释放酶基因,构建原核、真核表达载体,为开发生产人源激肽释放酶基因工程产品及人源激肽释放酶基因药物奠定基础.方法:提取人胰腺组织总RNA,逆转录后琼脂糖电泳初步鉴定PCR产物.将激肽释放酶cDNA回收、补平后插入克隆质粒KS,酶切鉴定后,对激肽释放酶基因进行序列测定分析.用双酶切法,插入原核表达载体PET-28b,真核表达载体pBacPAK9质粒中.酶切鉴定后,进行序列测定分析.结果:本实验克隆的激肽释放酶基因与GenBank报告的激肽释放酶基因相比,碱基序列相同.测序分析表明人胰组织激肽释放酶基因经酶切,正确插入到原核表达载体PET-28b,真核表达载体pBacPAK9质粒中.结论:克隆并构建成功中国人组织激肽释放酶基因的原核、真核表达载体,可用于基因工程产品及基因药物的深入研究工作.
关键词：胰酶基因克隆分子序列分析
分类号：R3(基础医学)
资助基金：广东省科技攻关项目(C11801)
论文发表日期：2002-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 1155-1157 )