mTn-3xHA/lacZ文库质粒的筛选与鉴定
赵慧1
郑文岭1
崔东1
江晓曦2
马文丽3
1.510010,广州市,广州军区广州总医院院肿瘤分子生物学研究所2.510641,华南理工大学食品生物工程学院3.510015,第一军医大学分子生物学研究所
摘要:目的:从pHSS6-mTn-3xHA/lacZ质粒文库中筛选出能高水平表达lacZ基因的质粒载体.方法:文库质粒转化大肠杆菌,挑单克隆,提质粒约200个,Notl酶切,分别转化酿酒酵母,通过URA3和lacZ的表达筛选出能发生同源重组,并能高水平表达lacZ的质粒载体.结果:200个质粒分别转化酿酒酵母,通过SC-URA筛选出11株能发生同源重组的重组子,再通过lacZ显色反应,筛选出两株有lacZ基因表达的菌株,其中一株能高水平表达β-gal,另一株有较弱表达.结论:筛选出的质粒载体为其它外源基因在酿酒酵母中稳定高效表达奠定基础.
关键词:mTn-3xHA/lacZ文库质粒 酵母菌酿酒 同源重组
分类号:R3(基础医学)
资助基金:国家自然科学基金(39880044)国家自然科学基金(39880032)
论文发表日期:2004-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:3( 986-988 )
