全长单纯疱疹病毒Ⅱ型糖蛋白D毕赤酵母表达载体的构建
刘仲荣1
曹春来1
杨慧兰1
郭勇2
王捷3
1.510010,广州军区广州总医院皮肤科2.510640,广州市华南理工大学生物科学与工程学院3.510010,广州军区广州总医院医学实验科
摘要：目的:构建单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)糖蛋白D(gD)的毕赤酵母表达载体,为进一步研制重组抗原诊断试剂、研究亚单位疫苗奠定基础.方法:PCR从HSV-2基因组中扩增gD2基因,再用PCR的方法在基因两端加入两个限制性内切酶切位点Xho Ⅰ和Xba Ⅰ;PCR产物经过双酶切后按照正确的读码框顺序克隆到毕赤酵母表达载体pPICZα A中;转化到大肠杆菌感受态细胞TOP 10 F'中,抗生素得到筛选转化子.结果:核酸序列测定PCR扩增的gD2片段与Gene Bank中HSV-2 G株gD DNA碱基同源性达98.4%,氨基酸同源性达95.7%.在实验过程中构建了四个表达载体,经过双酶切后琼脂糖电泳鉴定正确.结论:构建了gD2毕赤酵母表达载体四个,其中两个含有HSV-2 gB的CTL表位序列.
关键词：疱疹病毒2型人糖蛋白类毕赤酵母
分类号：R3(基础医学)
资助基金：国家自然科学基金(30371290)
论文发表日期：2005-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 1117-1119 )
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