幽门螺杆菌标准株NCTC11639 HSPA基因的克隆、表达及其抗原性的鉴定
李妍
宁云山
龙敏
董文其
李明
1.510515,广州市,南方医科大学生物技术学院2.510515,广州市,南方医科大学生物技术学院3.510515,广州市,南方医科大学生物技术学院4.510515,广州市,南方医科大学生物技术学院5.510515,广州市,南方医科大学生物技术学院
摘要：目的:构建含人幽门螺杆菌 (Helicobacter pylori,Hp)热休克蛋白 A( heat shock protein A,HSPA)编码基因的重组质粒,测定、分析其核酸序列,并在 E.coli 中表达 ,研究其抗原性.方法 :应用 PCR技术从 Hp DNA染色体中扩增 HSPA编码基因片段,将其 T- A克隆和测序,并与 GenBank公布的其他 Hp菌株基因序列比较,再将目的基因克隆至表达载体 pGEX- 4T- 1上进行表达和纯化,用 Western blot 检测产物的抗原性并用 ELISA法对 29株小鼠抗 Hp全菌单克隆抗体进行鉴定.结果: HSPA基因全长 351 bp( GenBank登录号为 DQ141574) ,核酸同源性为 96%～ 98%,表达的 HSPA融合蛋白分子量约为 41 ku,表达产物可被 Hp感染患者血清识别, 29株抗小鼠 Hp全菌单克隆抗体中有 4株是针对 HSPA抗原的.结论:重组 HSPA具有较好的抗原性,为 Hp疫苗的研究奠定基础.
关键词：螺杆菌幽门基因表达热休克蛋白质类克隆抗原性
分类号：R3(基础医学)
资助基金：国家科技攻关项目(2001CB510208)
论文发表日期：2006-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 981-984 )
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