单管巢式PCR结合熔解曲线分析检测乙肝病毒YMDD变异
杨建荣
戴利亚
陈占国
1.325000,温州医学院附属第一医院实验诊断中心2.325000,温州医学院附属第一医院实验诊断中心3.325000,温州医学院附属第一医院实验诊断中心
摘要：目的:在建立针对乙肝病毒(HBV)聚合酶基因的单管巢式PCR方法的基础上,结合熔解曲线分析,提高HBV YMDD变异检测的灵敏度.方法:针对HBV聚合酶基因段设计两对熔解温度(Tm)差异较大的内、外引物,在一个封闭反应体系中进行二次扩增并结合熔解曲线分析法检测HBV YMDD变异.结果分别与单纯PCR结合熔解曲线分析和测序法进行比较,并对107例未经拉米夫定治疗的慢性乙型肝炎(CHB)患者血清HBV YMDD的自发变异进行分析.结果:建立在单管巢式PCR方法上的熔解曲线分析检测HBV YMDD变异灵敏度要高于单纯PCR结合熔解曲线分析的方法(P＜0.001),与直接测序法的符合率为81.3%.在114例CHB标本中YMDD及其变异检出率为95.6%.用本方法在107例未经拉米夫定治疗的CHB病人中YMDD自发变异检出率为31.8%.结论:单管巢式PCR结合熔解曲线分析法提高了YMDD变异检测的灵敏度,而且是一种简便、特异性较好的方法.
关键词：肝炎病毒乙型聚合酶链反应熔解曲线分析YMDD变异
分类号：R4(临床医学)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 195-198 )
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