筛选环孢霉素A适体的SELEX技术的建立
李卫滨
兰小鹏
杨湘越
吴文冰
1.南京军区福州总医院全军医学检验中心,3500252.南京军区福州总医院全军医学检验中心,3500253.南京军区福州总医院全军医学检验中心,3500254.南京军区福州总医院全军医学检验中心,350025
摘要:目的:运用指数富集的配体系统进化(SELEX)技术,筛选并鉴定环孢霉素A(CsA)特异性的适体.方法:合成一个全长78个核苷酸中间含35个随机序列的随机单链寡核苷酸序列(ssDNA)文库,通过SELEX方法,即以磁珠作为筛选介质,利用生物素-链亲和素-辣根过氧化物酶系统检测每轮ssDNA文库与CsA的亲和力,筛选针对CsA的适体,将最后一轮筛选产物克隆测序并运用相关软件进行一级结构和二级结构分析.结果:经过10轮的筛选,ssDNA文库与CsA的亲和力呈上升趋势,随机挑选的19个克隆适体根据一级结构的同源性可分为5个家族,二级结构预测以茎环(发夹)为主.结论:我们通过改良SELEX方法筛选得到了CsA特异性的适体.
关键词:环孢菌素适体随机ssDNA文库
分类号:R9(药学)
资助基金:福建省自然科学基金(C0310037)
论文发表日期:2007-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:3( 2966-2968 )
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