p16基因克隆联合伊马替尼对慢性粒细胞白血病K562细胞作用的研究
王玮1
孙秉中2
刘庆春1
药立波3
1.解放军第175医院血液肿瘤科,福建省漳州市,3630002.第四军医大学西京医院血液科,西安市,7100323.第四军医大学生物化学和分子生物学教研室,西安市,710032
摘要：目的:探讨p16基因克隆联合伊马替尼对慢性粒细胞白血病细胞株K562细胞的增殖、周期及凋亡等的调控作用.方法:RT-PCR扩增p16基因,胶纯化回收后连接到T载体测序,序列正确后构建p16-pcDNA3.1载体,将p16-pcDNA3.1与空载体分别以脂质体转染入p16基因缺失的K562细胞,经筛选得到G418抗性的K562细胞株,Western blot证实转染后有p16蛋白表达,MTT法检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡.结果:反复测序发现,从K562细胞中扩增的DNA片段属于非特异性扩增,证实K562细胞中p16基因缺失.转染p16基因后表达外源性p16蛋白的p16-pcDNA3.1-K562细胞株生长速度明显减慢;伊马替尼作用于已转染p16-pcDNA3.1的K562细胞,其细胞存活率与伊马替尼作用未转染K562细胞及单纯转染p16-pcDNA3.1的K562细胞相比均明显降低.转染p16基因后GO/G1期细胞增多,S期细胞明显减少,p16-peDNA3.1-K562细胞与伊马替尼联合应用后凋亡细胞比例明显上升.结论:p16基因抑制K562细胞增殖并调节其周期.外源p16联合应用伊马替尼对抑制K562细胞增殖及促凋亡方面具有协同作用.
关键词：白血病淋巴细胞慢性基因p16K562细胞伊马替尼基因克隆
分类号：R73(肿瘤学)
资助基金：国家自然科学基金(39770336)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 700-703 )
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