单纯疱疹病毒2型全长糖蛋白D抗原的原核表达及抗原性分析
周翠1
曹春来1
樊建勇2
杨慧兰2
1.华南理工大学生物科学与工程学院,广州市,5106412.广州军区广州总医院皮肤科,510010
摘要:目的:构建单纯疱疹病毒2型(HSV-2)全长糖蛋白D(gD)基因原核表达质粒,研究其编码的蛋白质在大肠杆菌中的表达,并鉴定重组蛋白的gD抗原性.方法:提取病毒DNA,PCR扩增出gD基因,克隆于原核表达载体pGEX-4T-1,并转化大肠杆菌BL21.PCR、双酶切及测序证实插入的gD基因序列正确后,IPTG诱导表达融合蛋白GST-gD,并进行免疫学鉴定.结果:获得了gD DNA.测序鉴定表明,该序列与Gen Bank中的序列一致,gD基因已正确插入到pGEX-4T-1中.重组融合蛋白表达载体pGEX-4T-gD经IPTG诱导后能在大肠杆菌中高效表达,Westem Blotting证实,该蛋白具有天然gD抗原性.结论:成功构建了融合蛋白表达载体pGEX-4T-gD,在大肠杆菌中获得了有效表达.并证实融合蛋白具有gD免疫原性.为进一步研究gD蛋白的免疫学特性,制备gD亚单位疫苗和单克隆抗体奠定了基础.
关键词:单纯疱疹病毒属糖蛋白D重组融合蛋白抗原性
资助基金:国家自然科学基金(30371290)
论文发表日期:2008-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:3( 1668-1670 )
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实用医学杂志

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ISSN:1006-5725
年,卷(期):2008,24(10)
所属栏目:基础研究