EEF1A2嵌合型重组腺病毒载体的构建及鉴定
曹海霞
诸琦
章永平
黄佳
张愫
姚玮艳
1.上海交通大学医学院附属瑞金医院消化内科,2000252.上海交通大学医学院附属瑞金医院消化内科,2000253.上海交通大学医学院附属瑞金医院消化内科,2000254.上海交通大学医学院附属瑞金医院消化内科,2000255.上海交通大学医学院附属瑞金医院消化内科,2000256.上海交通大学医学院附属瑞金医院消化内科,200025
摘要：目的:克隆人类真核翻译延长因子1A2(EEF1A2)基因全长.构建其重组腺病毒载体.方法:应用RT-PCR方法从人胰腺癌组织中扩增人EEF21A2基因全长,经T-A克隆后,亚克隆到腺病毒穿梭质粒pDC316,构建穿梭质粒pDC316-EEF1A2.利用同源重组的方法将腺病毒骨架质粒pBHG35和穿梭质粒pDC316-EEF1A2共转染293细胞,获得腺病毒重组质粒Ad5/F35-EEF1A2,经过在293细胞中包装和扩增之后,获得高滴度的腺病毒重组质粒Ad5/F35-EEF1A2.PCR、Western Blot检测EEF1A2基因的表达.结果:用RT-PCR方法,从人胰腺癌组织中扩增出1 400 bp的cDNA片段,经测序证实为人EEF1A2基因.构建及包装出高滴度的重组腺病毒载体Ad5/F35-EEF1A2.结论:成功地克隆了人EEF1A2基因全长,并构建其表达的重组腺病毒载体,为进一步研究人EEF1A2基因在相关疾病中的作用奠定了基础.
关键词：腺病毒科EEF1A2腺病毒载体基因克隆
资助基金：国家自然科学基金(30670941)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 174-176 )
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