丙型肝炎病毒RNA聚合酶在HepG-2细胞的稳定表达及活性分析
熊舒珺
吴晓玉
孔令保
1.江西农业大学生物科学与工程学院发酵应用技术南昌市重点实验室,南昌市,3300452.江西农业大学生物科学与工程学院发酵应用技术南昌市重点实验室,南昌市,3300453.江西农业大学生物科学与工程学院发酵应用技术南昌市重点实验室,南昌市,330045
摘要：目的:探讨丙型肝炎病毒RNA聚合酶(NS5B)在肝癌细胞株HepG-2的稳定表达与活性.方法:Sca I酶切合有丙型肝炎病毒NS5B基因的重组表达载体pcDNA-5B,线性化的pcDNA-5B通过脂质体介导转染HepG-2细胞,G418筛选转染细胞.阳性细胞经基因组PCR、RT-PCR和Western Blot鉴定.体外RNA聚合酶试验和荧光素酶试验鉴定稳定表达NS5B蛋白的RNA聚合酶活性.结果:NS5B基因可整合到转染的HepG-2细胞的染色体上,并能有效转录和表达.体外RNA聚合酶试验和荧光素酶试验表明稳定表达的NS5B在体外和细胞内均具备RNA依赖的RNA聚合酶活性.结论:肝细胞HepG-2可以稳定表达丙型肝炎病毒NS5B,且具备RNA依赖的RNA聚合酶活性.
关键词：肝炎病毒属RNA聚合酶HepG-2细胞表达活性
资助基金：江西农业大学博士基金(2727)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 355-357 )
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