髓样相关蛋白8真核表达载体的构建及其细胞内定位
伍丽琼
吴翠玲
王娟
徐佳
邓鹏
姜勇
1.南方医科大学病理生理学教研室,广东省蛋白质组学重点实验室,广州市,5105152.南方医科大学病理生理学教研室,广东省蛋白质组学重点实验室,广州市,5105153.南方医科大学病理生理学教研室,广东省蛋白质组学重点实验室,广州市,5105154.南方医科大学病理生理学教研室,广东省蛋白质组学重点实验室,广州市,5105155.南方医科大学病理生理学教研室,广东省蛋白质组学重点实验室,广州市,5105156.南方医科大学病理生理学教研室,广东省蛋白质组学重点实验室,广州市,510515
摘要：目的:构建小鼠髓样相关蛋白8(MRP8)的真核表达栽体,观察其在NIH3T3细胞中的表达定位情况.方法:提取BALB/c小鼠肝脏组织的总RNA,通过逆转录-聚合酶链反应扩增得到MRP8编码序列,并将其克隆到带有血凝素(HA)标记的载体pcDNA3-HA上,随后将重组质粒瞬时转染NIH3T3细胞,利用荧光显微镜观察结果.结果:重组质粒经聚合酶链反应、酶切和测序鉴定证明构建正确,并且该质粒能够在NIH3T3细胞的胞浆、胞核中广泛表达,表达产物主要定位在细胞核中.结论:成功构建带有HA标签的MRP8真核表达载体.该载体能在哺乳动物细胞中有效表达并正确定位,为进一步研究MRP8作用细胞的信号通路提供了一个重要的工具.
关键词：髓样相关蛋白8血凝素类转染细胞内定位载体构建
资助基金：国家自然科学基金(30670828)国家重点基础研究发展计划（973计划）(2002CB13005)国家自然科学基金(U0632004)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 907-909 )
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