肿瘤血管内皮抑素tumstatin腺相关病毒载体的构建及其功能的初步鉴定
于磊1
孙岩2
雷铭德2
李娜2
韩瑞发2
1.710032,西安市,第四军医大学第一附属医院泌尿外科;300021,天津市泌尿外科研究所,天津医科大学第二附属医院泌尿外科,天津市泌尿外科基础医学重点实验室2.天津医科大学第二附属医院泌尿外科,天津市泌尿外科基础医学重点实验室,天津市泌尿外科研究所,300021
摘要：目的:探讨腺相关病毒(rAAV)-肿瘤内皮抑素(tumstatin)(简称rAAV-Tum)栽体的构建及其生物学效应的初步鉴定.方法:用PCR扩增tumstatin序列至pAAV-MCS载体,构建pAAV-Tum;采用AAV-Helper Free System包装系统、"氯仿-PEG/NaCl沉淀-氯仿抽提"及冰乙醇沉淀法进行AAV的包装、纯化和浓缩;用人脐静脉内皮细胞(HUVEC)对rAAV-Tum生物学效应进行初步鉴定.结果:成功构建pAAV-Tum载体,并经酶切、PCR及测序证实;rAAV病毒颗粒滴度达2 × 1010 v.p/mL,浓缩后可达到2×1011～12 v.p/mL;rAAV-Tum可以分泌内皮抑素,诱导HUVEC凋亡.结论:成功构建rAAV-Tum腺相关病毒,体外实验表明该病毒能高效诱导内皮细胞的凋亡.
关键词：自身抗原胶原Ⅳ型肿瘤内皮抑素腺相关病毒人脐静脉内皮细胞
资助基金：国家自然科学基金(30872559)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 1100-1103 )
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