含A(H1N1)流感病毒NP基因病毒样颗粒的构建和表达
王云龙1
徐桂超1
李智涛2
孙新城3
王国强2
昌静峰2
李彦霞4
1.河南师范大学生命科学学院,河南省新乡市,4530072.河南省生物工程技术研究中心,郑州市,4500013.郑州大学,4500014.郑州轻工业学院,450002
摘要：目的:构建并表达含有A(H1N1)流感病毒NP基因片段并可抗RNase降解的病毒样颗粒,作为RT-PCR检测的阳性对照.方法:设计带有Nco Ⅰ、BamHⅠ酶切位点的引物克隆MS2噬菌体的装配蛋白和包膜蛋白基因,化学合成含BamH Ⅰ和Hind Ⅲ酶切位点的A(H1N1)流感病毒NP基因片段,将这些基因连接到质粒载体pET-28b(+)上,转化到E.coli BL21(DE3)感受态细胞中进行表达,表达产物进行纯化,然后进行RNase攻击试验和稳定性试验.结果:获得含NP基因片段的病毒样颗粒,可抵抗RNase降解,并能在37℃稳定保存30 d.结论:该病毒颗粒稳定、安全、可靠,可作为A(H1N1)流感病毒RT-PCR检测、定量分析的有效阳性参考品.
关键词：流感病毒A型H1N1亚型RT-PCR阳性对照病毒样颗粒核糖核酸酶
资助基金：河南省科技攻关计划(102102313105)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 3083-3086 )
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