幽门螺杆菌临床分离株尿素酶基因B的原核表达、纯化及免疫活性
周珍文
关锐梨
夏慧敏
邓秋连
谢永强
黄勇
廖灿
龚四堂
1.广州市妇女儿童医疗中心,5101202.广州市妇女儿童医疗中心,5101203.广州市妇女儿童医疗中心,5101204.广州市妇女儿童医疗中心,5101205.广州市妇女儿童医疗中心,5101206.广州市妇女儿童医疗中心,5101207.广州市妇女儿童医疗中心,5101208.广州市妇女儿童医疗中心,510120
摘要：目的:在大肠杆菌中表达幽门螺杆菌临床分离株尿素酶B(UreB),纯化重组蛋白并分析其免疫活性.方法:将pGEX-4T-1-UreB重组菌BL21复舒,挑单菌落接种于含氨苄的LB培养基中.0.5 mmoL异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组融合蛋白的表达,使用纯化的重组蛋白免疫小鼠.ELISA检测血清抗体效价,并使用感染患者血清进行Western-blotting鉴定重组蛋白反应原性.结果:SDS-PAGE示在约87 kD相应分子量可见融合蛋白表达,产物主要在表达上清以可溶形式存在,纯化蛋白免疫小鼠能诱导产生特异性体液免疫应答,ELISA检测特异性IgG效价为1:51 200.Western blotting示重组蛋白能被幽门螺杆菌感染患者血清识别.结论:UreB在大肠杆菌中获得高效表达,表达产物具有较好的免疫原性及反应原性.
关键词：螺杆菌幽门尿素酶B免疫活性
资助基金：国家自然科学基金(30801054)广东省自然科学基金(8451012001001570)广州市医药卫生科技项目(2008-YB-067;30307-3200818)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 3673-3675 )
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