NR2B反义寡核苷酸对大鼠脊髓星形胶质细胞体外分泌TNF-α及释放谷氨酸的影响
花柱明1
林世清2
孙怡1
李真1
1.广东省人民医院麻醉科,广州市,5100802.中山大学附属第一医院麻醉科,广州市,510080
摘要：目的:观察N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚基(NR2B) 反义寡核苷酸对体外培养的大鼠脊髓星形胶质细胞(AST)分泌肿瘤坏死因子(TNF)-α及释放谷氨酸(Glu)的影响.方法:取新生2 ～ 3 d新生的SD大鼠L4 ～ 6脊髓背角AST细胞原代纯化培养,C 组:正常对照,除加入与干预组等量的培养液外不加任何药物;脂多糖(LPS)组:在培养液中加入LPS,终浓度为1 mg/L,孵育24 h;SNR2B组:在培养液中加入经lipofectamine2000处理的NR2B反义寡核苷酸,终浓度为2 μmol/L,孵育48 h后再加入LPS,终浓度1 mg/L,再孵育24 h;ANR2B组:在培养液中加入经lipofectamine2000处理的NR2B正义寡核苷酸,终浓度为2 μmol/L,孵育72 h后再加入LPS,终浓度1 mg/L,孵育24 h;5 000 r/min离心15 min后取上清液和细胞,分别用于TNF-α、Glu和NR2B mRNA检测.应用酶联免疫吸附法(ELISA) 检测上清液中TNF-α的浓度;用高效液相色谱仪测定Glu含量,RT-PCR检测NR2B mRNA的表达.结果:与C组比较,LPS组和ANR2B组释放的TNF-α和Glu显著增加(P ＜ 0.01),而SNR2B组无显著变化;与LPS组和ANR2B组相比,SNR2B组释放的TNF-α和Glu减少(P ＜ 0.01).与C组比较,LPS组和ANR2B组AST细胞的NR2B mRNA的表达显著升高(P ＜ 0.01),而SNR2B组差异无显著性.结论:NR2B反义寡核苷酸下调脊髓AST细胞NR2B mRNA 表达,减少TNF-α和Glu的释放.
关键词：寡核苷酸类反义N甲基-D-天冬氨酸受体2B亚基星形胶质细胞脊髓
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）