重组人pEGFP-C2-NPHS2表达载体的构建及其在人胚胎肾293细胞中的表达
沙玉根
赵非
张爱华
黄松明
1.南京医科大学附属南京市儿童医院肾脏科,2100082.南京医科大学附属南京市儿童医院肾脏科,2100083.南京医科大学附属南京市儿童医院肾脏科,2100084.南京医科大学附属南京市儿童医院肾脏科,210008
摘要：目的:构建人pEGFP-C2-NPHS2表达载体,并观察其在人胚胎肾(HEK)293细胞中的表达.方法:应用基因重组技术,构建增强绿色荧光蛋白与NPHS2的融合表达载体,经PCR、限制性内切酶酶切和测序鉴定,应用基因转染技术将其转入HEK293细胞中,荧光显微镜和免疫印迹检测NPHS2的表达产物podocin.结果:经鉴定目的基因NPHS2全长插入重组质粒,HEK293细胞不表达NPHS2基因,转染后可以检测到绿色荧光蛋白分布于细胞的膜周部,免疫印迹证实为编码蛋白podocin.结论:成功构建重组人pEGFP-C2-NPHS2表达载体,有助于进一步研究podocin在足细胞疾病中的作用.
关键词：足细胞HEK293细胞NPHS2表达载体基因重组
资助基金：国家自然科学基金(30100081)南京市卫生局项目(ZKM06043)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 938-941 )
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