重组质粒pENTR-CMV-EGFP-hsa-mir-16-1/15a的构建与表达
方潇碧1
张春鸿1
黄亚2
林森1
黄振校1
吴丽萍1
施清圆1
李文峰3
廖志苏1
1.温州医学院附属第一医院耳鼻咽喉科,3250002.浙江省温州市第八人民医院耳鼻咽喉科,3250003.温州医学院附属第一医院放疗科,325000
摘要：目的:构建针对人鼻咽癌CNE-2Z细胞Bcl-2基因pENTR-CMV-EGFP-hsa-mir-16.1/15a真核表达质粒,转染至CNE-2Z细胞并检测其表达.方法:采用PCR法从重组质粒PGH-16-1/15a中获得16-1/15a-X2370G全长序列,在T4 DNA Ligase连接酶作用下连接入重组载体pENTR-CMV-EGFP.重组质粒经酶切及测序鉴定.将构建成功的重组质粒转染入人鼻咽癌细胞株CNE-2Z,用荧光显微镜观察转染结果.结果:重组质粒pENTR-CMV-EGFP-hsa-mir-16-1/15a经酶切与测序证实构建成功,转染至鼻咽癌CNE-2Z细胞后,荧光显微镜观察证实该重组质粒能在CNE-2Z中表达.结论:成功构建真核表达质粒DENTR-CMV-EGFP-hsa-mir-16-1/15a,并在鼻咽癌CNE-2Z细胞中得到表达,可用于进一步检测其抗肿瘤机制.
关键词：质粒16-1/15a-X2370GCNE-2Z构建表达
资助基金：浙江省科技计划(2010C34005)浙江省温州市科技计划(Y20090044)浙江省温州市鹿城区科技计划(S090103)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 2108-2110 )
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