小鼠Nestin启动子的克隆及其表达载体的构建
张丽1
袁红花1
袁凤刚2
朱孝荣2
1.徐州医学院神经生物教研室,2210022.徐州医学院实验动物中心,221002
摘要：目的:克隆Nestin基因启动子序列,并研究其调控能力.方法:用高保真酶PCR扩增出小鼠Nestin启动子全序列、核心序列,pcDNA3.1质粒双酶切切掉CMV启动子序列,将Nestin基因启动子序列插入到原CMV启动子位置,pEGFP-N1质粒双酶切下EGFP序列,克隆入pcDNA3.1多克隆位点中,重组构建质粒,分别用Nestin启动子全序列和核心序列调控EGFP基因的表达.重组质粒分别转染Nestin+细胞和Nestin-细胞,观察EGFP基因在细胞内的表达情况.结果:成功克隆出Nestin基因启动子全序列和核心序列.经酶切鉴定及测序证实正确.二序列皆能调控EGFP在各种细胞内的表达.结论:Nestin基因启动子全序列和核心序列具有非特异性调控能力.
关键词：遗传载体启动子Nestin调控转染
资助基金：江苏省自然科学基金(BK2010180)徐州市科技计划(XM098116)徐州医学院院长项目(2010KJZ10)
论文发表日期：2012-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 370-373 )
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