风湿性心脏病心肌组织噬菌体表达文库的构建和分析
李运雄1
孟锦绣2
朱平3
卢聪3
郑少忆3
余细勇2
1.510080 广州市,广东省人民医院,广东省医学科学院检验科2.510080 广州市,广东省人民医院,广东省医学研究中心3.510080 广州市,广东省人民医院,广东省心血管病研究所
摘要：目的:构建风湿性心脏病患者心脏组织噬菌体表达文库.方法:外科手术治疗中取风湿性心脏病患者新鲜心耳组织,用QIAGEN试剂盒提取RNA,用逆转录酶合成cDNA第一链,用长距离PCR合成双链cDNA,SfiⅠ酶切cDNA后过柱分级收集,用T4 DNA连接酶重组连接入λTriplEx2载体,最后用λ噬菌体包装后构建成原始文库,用PCR、X-gal等方法进行文库质量鉴定.结果:构建了风湿性心脏病心肌组织噬菌体表达文库,原始文库滴度为3.3×106 pfu/mL,重组率为99％,81.25％外源重组片段大于1 kb.结论:成功构建了高质量的风湿性心脏病患者心肌组织噬菌体表达文库,为风湿性心脏病的分子机制寻找新的研究策略奠定了实验基础.
关键词：风湿性心脏病噬菌体表达文库构建
资助基金：国家自然科学基金(30700327)广东省自然科学基金(7300047)广东省科技计划(2008658)广东省医学科研基金(A2010046)
论文发表日期：2012-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 1398-1400 )
英文信息