福氏志贺菌ipaB基因的克隆表达及免疫原性研究
王国富
薛士鹏
白丽
吴利先
1.云南大理学院基础医学院微生物学教研室, 云南省大理市,6710002.云南大理学院基础医学院微生物学教研室, 云南省大理市,6710003.云南大理学院基础医学院微生物学教研室, 云南省大理市,6710004.云南大理学院基础医学院微生物学教研室, 云南省大理市,671000
摘要：构建福氏志贺菌ipaB基因的原核表达载体,诱导表达并纯化.探讨重组蛋白IpaB经口服免疫小鼠后,机体产生的免疫应答.方法:用PCR扩增ipaB目的基因,克隆至pQE-30表达载体中,转化宿主菌DH5α,经IPTG诱导表达蛋白IpaB;Western blot分析其抗原性.纯化后灌胃免疫小鼠,ELISA法检测血清IgG、IgA、小肠黏液sIgA和粪便sIgA.结果:ipaB基因全长1 743 bp.经SDS-PAGE分析相对分子量(Mr)约为64 000.Western blot分析能与福氏志贺菌全菌抗血清反应.免疫小鼠后,血清IgA、IgG,粪sIgA,肠黏液sIgA明显高于对照组(P＜0.01).结论:成功构建了ipaB基因的原核表达载体并能高效表达,纯化后口服免疫可有效诱导黏膜免疫应答,产生高水平的sIgA,发挥局部黏膜免疫作用,为进一步研究细菌性痢疾的疫苗和发病机制奠定基础.
关键词：志贺菌弗氏ipaB基因克隆表达免疫原性
资助基金：云南省教育厅基金重点项目(09Z0078)
论文发表日期：2012-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 3183-3185 )