肠出血型大肠埃希菌O157：H7 Tir基因的原核表达
余芳1
龙北国1
王金辉2
王芮宁3
吴娴波1
范宏英1
1.南方医科大学公共卫生与热带医学学院, 广州市,5105152.511300,广东省增城市中医医院3.南方医科大学生物技术学院
摘要：目的：高效表达出血型大肠埃希菌O157：H7转位紧密黏附素受体Tir （translocation inti min receptor）的C末端蛋白，并初步鉴定其活性。方法：对EHEC O157：H7标准株EDL933 Tir完整的编码区基因序列和氨基酸序列进行生物信息学分析，选取C末端基因（命名为Tir-C），构建原核表达质粒PET-30a（＋）-Tir-C，转至E．coli BL21/DE3中，IPTG诱导表达，SDS-PAGE检测相对分子质量，Western blot鉴定免疫原性。结果：PCR扩增出675 bp的目的片段，构建的质粒经酶切鉴定及测序与预期一致。目的蛋白在裂解上清中有表达，纯化浓度达500μg/ mL，并有较好的免疫原性。结论：成功表达了有抗原活性的重组Tir-C蛋白，为研究0157：H7疫苗奠定了基础。
关键词：出血型大肠埃希菌O157:H7Tir-C表达活性鉴定
资助基金：国家自然科学基金(31300762)广东省医学科学技术研究项目(B2012206)广东省科技计划(2012B031800132)
论文发表日期：2014-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 1519-1522 )
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