miR-17下调整合素分子β1抑制卵巢癌腹腔播散

盛慧; 陈慧; 潘丽; 李丹

doi:10.3969/j.issn.1006-5725.2014.19.011

摘要：目的：寻找调控整合素分子β1（ITGB1）的 microRNA，并验证在卵巢癌中其对 ITGB1的特异性调控作用及对卵巢癌细胞腹腔播散的影响。方法：用生物信息学网站预测特异性调控ITGB1的microRNA，比较NCI-60细胞信息库中两者之间 mRNA 水平的相关性；在多种卵巢癌细胞系中进一步验证 microRNA的表达和ITGB1蛋白水平之间的相关性；双荧光素酶报告系统验证microRNA对ITGB1特异性调控作用， Western blot 检测高低表达microRNA 后对ITGB1蛋白水平的影响；体内外黏附试验比较过表达 microRNA后对卵巢癌细胞黏附细胞外基质能力的影响。最后通过免疫缺陷小鼠体内腹腔成瘤试验对比过表达此microRNA对腹腔成瘤能力的影响。结果：在NCI-60中验证生物信息学预测到得miR-17与ITGB1的mRNA表达水平显著负相关（r＝-0．567， P＜0．0001）；在卵巢癌细胞系中，高表达ITGB1的细胞系SKOV3、OV90、CaOV4和 OVCAR3的 miR-17表达水平显著低于 ITGB1低表达组（TOV21G、ES2、CaOV3、TOV112D）；双荧光素酶报告系统证明卵巢癌细胞中miR-17特异性的结合ITGB1-3′UTR区域并下调ITGB1蛋白水平；黏附试验结果表明过表达miR-17后卵巢癌细胞体内外黏附能力均下降；体内成瘤试验结果过表达miR-17后卵巢癌细胞SKOV3-GFP腹腔播散病灶较对照组显著减少。结论：卵巢癌细胞中miR-17与ITGB1水平显著负相关，过表达miR-17可以下调ITGB1进而抑制卵巢癌细胞腹腔播散。